lunes, 21 de diciembre de 2015

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CALIDAD MICROBIOLÓGICA DE CHÍA

“CALIDAD MICROBIOLÓGICA de Salvia hispánica expendida en el mercado modelo huancayo, SETIEMBRE A diciembre  2015”
Violeta Seguil Alvarado
INTRODUCCIÓN:
La semilla de chía (salvia hispánica l.) es un alimento endémico de México, sin embargo con el paso del tiempo su consumo se había disminuido, recientemente resurgió el interés por la chía, ya que se encontró que posee un elevado contenido de ácidos grasos omega-3, antioxidantes y posee una buena fuente de fibra dietaría. Algunos de sus efectos terapéuticos no han sido demostrados científicamente.
Formulación del problema: ¿Cuál es la calidad microbiológica de la semilla de salvia hispánica “chía” expendida en el mercado modelo de Huancayo?
Objetivos: evaluar la calidad microbiológica de la semilla de salvia hispánica (chía) expendida en el mercado modelo de Huancayo entre Setiembre a Diciembre del 2015.
Hipótesis: las semillas de salvia hispánica (chía) expendida en el mercado modelo de Huancayo entre setiembre a diciembre del 2015 presenta una calidad microbiológica aceptable.
Metodología: la presente investigación correspondió al tipo de estudio básico, transversal, observacional y prospectivo; según el nivel fue de tipo descriptivo.
Resultados: Se realizó el análisis microbiológico aplicando técnicas de control microbiológico tales como recuento total de bacterias aerobias mesófilas viables, colimetría total, colimetría fecal y detección de Salmonella spp.; los resultados  nos indican que sólo el 18.52% de las muestras  presentan parámetros de calidad microbiológica dentro de los límites permisibles y por tanto son aptas para el consumo humano; mientras que la gran mayoría (81.48%) no lo son,  los cuales están establecidos en los Criterios de calidad microbiológica para granos, cereales, leguminosos y derivados, (MINSA/DIGESA 2003). Demuestran que el producto no es apto para el consumo humano por la inadecuada conservación de las semillas de chía.
Barrios, H 2006, investigo la  evaluación y mejoramiento de la calidad microbiológica de queso fresco a base de leche no pasteurizada, elaborada artesanalmente. En los resultados del producto final <10 UFC/gr de coliformes fecales, <1 UFC/gr de E. coli y <1,000 UFC/gr de S. aureus, por lo que la evaluación microbiológica post intervención de queso fresco evidenció que la aplicación de las medidas correctivas permitieron obtener recuentos microbiológicos dentro de los límites permitidos y que el producto fuera considerado apto para el consumo humano. 1
Ávila G y Fonseca M, 2008. Investigo calidad microbiológica de jugos preparados. Se estableció un número de 60 muestras en un periodo de 2 meses. De  las 60 muestras analizadas se obtuvo 36.7% de mesofilos, 96.7% de hongos y levaduras, 71.7% de coliformes totales en el jugo, y 23.3% de coliformes fecales, en cuanto al análisis microbiológico de las aguas se evidencio 55% de coliformes totales y 20% de coliformes fecales por encima de la norma. Se logró demostrar que la fuente de contaminación de coliformes totales y E. coli de los jugos en el agua, posiblemente es una fuente de enfermedades diarreicas en los niños. 2
Jiménez. C, 2010. investigo la evaluación de la calidad microbiológica de los alimentos expendidos en la cafetería del centro universitario del total de muestras analizadas el 57% mostró resultados no satisfactorios para el conteo de coliformes totales, 26% de las mismas tuvieron crecimiento no satisfactorio de E. coli y 60% fueron no satisfactorio y es deficiente. El 56.6% de los alimentos se encontraban en la zona de riesgo de temperatura en el momento de toma de muestra (> 5º C para alimentos fríos y < 57º C para alimentos calientes, según el código de alimentos de la FDA). 3
Villacreses R, 2011 estudio evaluación del procesamiento artesanal del chocho (lupinus mutabilis sweet). El estudio estimó que este proceso genera una relación en peso de chocho desamargado (producto): chocho crudo durante el proceso se separa el 94.4% de los alcaloides inicialmente presentes expresado en base seca. Encontró además  de aerobios totales en el producto, de 106 y la presencia de Escherichia coli. 4
Coto y Chaves, 2012. investigo la Calidad bacteriológica y detección de Bacillus cereus toxigénicos en arroz blanco cocido, de las muestras analizadas 46% fueron positivas por coliformes totales, 34% por coliformes fecales, 16% por E. Coli, 10% por B. cereus y un 8% por B. cereus toxigenico, lo anterior sugiere que el consumo de arroz blanco en restaurantes puede representar un riesgo para la salud pública y que es necesario implementar mejoras con el fin de brindarle al consumidor un producto inocuo y de mejor calidad.5
Chía: Origen: La chía tiene una larga historia como alimento humano. Su domesticación se remonta a los antiguos mexicanos en el año 2600 A.C. El amaranto, los porotos, la chía y el maíz comprendían los componentes principales de las dietas de las civilizaciones aztecas y mayas, cuando Colón llegó al Nuevo Mundo estas civilizaciones consumían como alimento la chía.
Composición de la Semilla Chía.
La chía es una semilla oleaginosa que además de su alto contenido de Omega-3 presenta en su composición otros componentes de gran interés para la nutrición humana, como la fibra, las proteínas, los antioxidantes, las vitaminas y algunos minerales. La semilla de chía contiene entre un 0,25g y 0,38g aceite, donde los mayores constituyentes son los triglicéridos, en el que los ácidos grasos poli-insaturados están presentes en altas concentraciones (R. Ayerza, 1995) 6
Los resultados encontrados de los ácidos grasos insaturados versan sobre tres principalmente: ácido linolénico, ácido linoleico, siendo el linolénico el de mayor abundancia en la semilla de chía, lo que representa una importancia nutricional destacable porque éste participa como precursor de otros ácidos grasos esenciales y además da origen a ciertas prostaglandinas, Leucotrienos y Tromboxano con actividad antiinflamatoria, anticoagulante y antiagregante. (Silveira Rodríguez, Monereo Mejías, & Molina Baena, 2003)7
Por intervenir en la prevención de enfermedades cardiovasculares, siendo anti-trombótico, anti-inflamatorio, anti-rítmico, favoreciendo la estabilización plaquetaria, entre otros (Galli & Marangoni, 2006) 8
Contaminación de origen intestinal.- Los indicadores bacteriológicos de contaminación son organismos de un grupo específico, el cual por su sola presencia, demuestra que ha ocurrido contaminación.
Las excretas intestinales que abandonan el cuerpo del hombre y de los animales de sangre caliente generalmente incluyen una gran variedad de géneros y especies de bacterias. Entre ellos están los grupos de los coliformes, especies de los géneros Streptococcus, Pseudomonas, bacterias esporuladas y otras.
Los coliformes totales se refieren a un grupo de bacterias de forma bacilar, no espeoruladas, aerobias o anaerobias facultativas, Gram negativas que fermentan la lactosa con producción de gas y acido en 48 horas  35°C.En este grupo se encuentran especies de Escherichia, Enterobacter, Citrobacter, Serratia, Klebsiella.
Los coliformes fecales se refieren estrictamente a Escherichia coli y otras especies estrechamente relacionadas con este género, que tienen la capacidad de fermentar la lactosa a 45°C con producción de ácido y gas. (Espinoza L) 9
Calidad microbiológica:
Es el grado de excelencia que posee un producto, en qué grado es bueno para cumplir su finalidad. Un producto será de buena calidad cuando cubra los requisitos establecidos por el cliente, reúna las características esperadas por los consumidores (Espinoza L). 10
Calidad Higiénico-Sanitaria: Que no se distribuyan microorganismos patógenos para la salud.
Calidad Comercial: Presencia de microorganismos alterantes, que alteren el producto haciéndolo no comestible (aunque no sean patógenos). (Espinoza L.)  11
Evaluación de la Calidad microbiológica:
Recuento de colonias: Se conoce el número total de microorganismos presentes en el alimento. En general se investiga la presencia de microorganismos aerobios aunque, en ciertas situaciones (alimentos envasados al vacío), puede ser de interés hacer recuentos de anaerobios totales. Se han desarrollado técnicas que hacen posible la automatización del proceso. (Mossel B) 12
Técnicas biológicas básicas de recuento de viables.-
Recuento en placa Standard (Standard Plate Count). - Consiste en el plaqueo de una muestra de volumen conocido del alimento que se analiza. El resultado es función de una serie de factores como son el método de muestreo, el tipo de microorganismo, el tipo de alimento y las características del medio de cultivo. Los cultivos pueden hacerse tanto en masa como en superficie, aunque hay que considerar que los cultivos en masa son letales para la flora psicotrofa. Cada bacteria viable formará una colonia, el plaqueo puede hacerse en una placa normal o por medio de un plaqueador en espiral que va depositando concentraciones progresivamente más diluidas de la muestra. (Mossel B) 13
MATERIAL Y MÉTODO
Método científico: Se empleó el método observacional
Tipo, nivel y diseño de investigación: correspondió al tipo de estudio básico, transversal, observacional y prospectivo; según el nivel fue de tipo descriptivo (Hernández R, Fernández C). 14
Diseño: Se aplicó un diseño descriptivo transversal, con ensayos en el Laboratorio de Microbiología y Parasitología de la Facultad de Ciencias de la Salud de la Universidad Peruana Los Andes.
Población: La población estuvo  constituida por todas las semillas de salvia hispánica (chía) expendida en el mercado modelo Huancayo entre los meses de setiembre a diciembre del 2015.
Muestra y tipo de muestreo: Estuvo constituida por 30 muestras de semillas de salvia hispánica  escogidas mediante un muestreo no probabilístico intencionado.
Obtención de muestras:
Se aplicó un muestreo no probabilístico. Las muestras se colectaron en recipientes de plástico y se colocó etiquetas que contenían datos como: Código de muestra, fecha de recolección y lugar de procedencia. Inmediatamente, las muestras fueron trasladadas al Laboratorio de Microbiología y Parasitología de la Facultad de Ciencias de la Salud (UPLA) para los respectivos análisis microbiológicos.
Dilución de las muestras: Antes de realizar los ensayos microbiológicos se realizan diluciones decimales de las muestras, procediendo con cada muestra de la siguiente forma: se tomó 1,0 mL de la semilla de salvia hispánica y se vertió a un tubo de (16x150mm) conteniendo 9,0 mL de agua destilada estéril (dilución 10-1), se homogenizó y transfirió luego 1,0 mL a otro tubo (16x150mm) con 9,0 ml de agua destilada estéril (dilución 10-2), homogeneizándolo y transfiriendo finalmente 1,0 mL a otro tubo similar (dilución 10-3).(Mendo M).33
Ensayos microbiológicos: Realizadas las diluciones se procedió a realizar ensayos microbiológicos por triplicado, según como sigue:
Evaluación de la calidad comercial:
Recuento total de bacterias aerobias mesófilas viables
Se aplicó el Método de Recuento en Placa, mediante técnica de siembra por incorporación; para lo cual se colocó 1,0 mL de cada dilución en placas Petri a las que se le agregó agar PCA (Plate count agar) fundir a 45°C; posteriormente se incubó en estufa a 37ºC por 48 horas. El recuento se realizó utilizando la Cámara Contadora de Colonias y se expresara en UFC/ml. (Mossel B) 15
Evaluación de la calidad higiénico-sanitaria.-16
Colimetría total: mediante la técnica del Número más probable (NMP); para lo cual se sembró 1,0 mL de cada dilución a una serie de tres tubos (16x150mm) conteniendo cada uno 10,0 mL de Caldo Brila estéril más campana Durham  invertida; los cuales se incubó en baño maría a 35°C durante 48 horas. Se verificara la presencia de gas y turbidez en los tubos, comparando con la Tabla del Número más probable.
Colimetría fecal: mediante la técnica del Número más probable (NMP); para lo cual se sembrara 1,0 mL de cada dilución a una serie de tres tubos (16x150mm) conteniendo cada uno 10,0 mL de Caldo Brila estéril más campana Durham invertida; los cuales se incubó en baño maría a 44°C durante 48 horas. Se verificara  la presencia de gas y turbidez en los tubos, comparando con la Tabla del Número más probable.
Detección de Salmonella: mediante la Técnica de siembras por estría; para ello se sembrara 1,0 mL de la dilución 10-1 de la muestra en un tubo (16x150mm) conteniendo 10 ml de caldo Selenito el que luego se incubaron en la estufa a 37ºC por 8 horas; posteriormente se sembraron de dicho tubo –por estría- a 2 placas Petri conteniendo agar SS (Salmonella-Shigella) llevándolas a incubación a 37ºC durante 48 horas.
Palabras claves: calidad microbiológica, chía, mesófilos, coliformes, Samonella.
RESULTADOS:
Tabla N° 1.- Resultados de la calidad microbiológica de las semillas de salvia hispánica dela primera sesión de muestreo
Parámetros
Resultados
(UFC/mL)
Límites
permisibles
Criterio de aceptación
1° Muestra
2° Muestra
3° Muestra
Recuento total de bacterias mesófilas viables
1.2 x 104
7.2 x 103
7.4 x 102
1 x 102 UFC/mL
Inaceptables
Colimetría total
0
0
0
10 NMP/mL
Colimetría fecal
0
0
0
3 NMP/mL
Detección de Salmonella
0
0
0
0 UFC/mL
Fuente: Elaboración propia, Noviembre 2015
Tabla N° 2.- Resultados de la calidad microbiológica de las semillas de salvia hispánica de la segunda sesión de muestreo

Parámetros
Resultados
(UFC/mL)
Límites
permisibles
Criterios de aceptación
1° Muestra
2° Muestra
3° Muestra
Recuento total de bacterias mesófilas viables
7.3 x 10
4.3 x 10
5.0 x 10
1 x 102 UFC/mL
Aceptables
Colimetría total
0
0
0
10 NMP/mL
Colimetría fecal
0
0
0
3 NMP/mL
Detección de Salmonella
0
0
0
0 UFC/mL
Fuente: Elaboración propia, Noviembre 2015

Tabla N° 3.- Resultados de la calidad microbiológica de las semillas de salvia hispánica de la tercera sesión de muestreo

Parámetros
Resultados
(UFC/mL)
Límites
permisibles
Criterios de aceptación
1° Muestra
2° Muestra
3° Muestra
Recuento total de bacterias mesófilas viables.
5.8 x 103
3.5 x 103
5.1 x 103
1 x 102 UFC/mL
Inaceptables
Colimetría total
120
0
64
10 NMP/mL
Colimetría fecal
20
0
0
3 NMP/mL
Detección de Salmonella
0
0
0
0 UFC/mL
Fuente: Elaboración propia, Noviembre 2015
DISCUSIÓN:
Se realizó el análisis microbiológico aplicando técnicas de control microbiológico tales como recuento total de bacterias aerobias mesófilas viables, colimetría total, colimetría fecal y detección de Salmonella spp.; los resultados  nos indican que sólo el 18.52% de las muestras analizadas presentan parámetros de calidad microbiológica dentro de los límites permisibles y por tanto son aptas para el consumo humano; mientras que la gran mayoría (81.48%) no lo son, pues sobrepasaron dichos límites; los cuales están establecidos en los Criterios de calidad microbiológica para granos, cereales, leguminosos y derivados, (MINSA/DIGESA 2003). Demuestran que el producto no es apto para el consumo humano por la inadecuada conservación de las semillas de chía.
Según los mencionados criterios, se establece que una muestra analizada  debe de cumplir con todos los parámetros establecidos para que sea aceptable. Por otro lado, basta que no se cumpla con uno de los parámetros para que sea rechazada (inaceptable) o no apta para consumo humano porque su conservación está expuesta al medio ambiente.
Los resultados obtenidos del análisis microbiológico de la chía sobrepasaron los límites permitidos para el consumo, pues las personas que  expenden la chía no cuentan con las medidas higiénicas personales e indumentaria adecuada; siendo estos los factores que pueden propiciar la contaminación.
Refai en1981,17 menciona que cerca del 40% de las personas adultas contienen bacterias, por lo que las manos se encuentran frecuentemente contaminadas, entonces en el momento de la manipulación del producto se contaminan, con el consiguiente riesgo de ser transmitidos hacia personas susceptibles; toda vez que estas semillas son conservadas a temperatura ambiental por varias horas, entonces pueden multiplicarse y favorecer el mayor crecimiento de estas bacterias, con lo cual también se altera dicho producto.
Las limitaciones de esta investigación se centran en el poco tiempo realizado y en las escasas ocasiones de experimentación de dicho grano.
 Se concluye que al comparar los resultados con los Criterios de calidad microbiológica para granos, cereales, leguminosa y derivada; se determinó que el 81.48% de muestras poseen calidad microbiológica inaceptable, siendo por tanto no aptos para el consumo humano.
se recomienda capacitar y orientar de manera individual o colectiva a las personas micro comerciantes que se dedican a la actividad de venta de las semillas de chía, sobre los riesgos que implica la mala higiene y contaminación de sus productos.Promover, fomentar y propiciar a las actividades económicas informales en una actividad empresarial y certificada a nivel higiénico-sanitario.
Se agradece Con inmenso reconocimiento a la Universidad Peruana Los Andes, “Alma Mater”, que nos albergó en su seno durante nuestra formación profesional. Y de la misma forma a  todos nuestros profesores, quienes nos transmitieron sus valiosos conocimientos y experiencias; de manera muy especial a los profesores de la Carrera profesional de Farmacia y Bioquímica, quienes día tras día contribuyeron en nuestra formación académica.    
Declaración de intereses; la investigación no tiene ninguna subvención de ninguna empresa.            
 BIBLIOGRAFÍA
1.         Barrios Centeno H. Evaluación y mejoramiento de la calidad microbiológica de queso fresco a base de leche no pasteurizada, elaborado artesanalmente y comercializado en la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. [título de tesis profesional].Guatemala: universidad de san Carlos de Guatemala; 2006. http://biblioteca.usac.edu.gt/tesis/06/06_2422.pdf
2.         Ávila  G, Fonseca M. Investigo calidad microbiológica de jugos preparados en hogares de bienestar familiar en la zona norte de Cundinamarca. [tesis para optar título]. Bogotá, Colombia: Pontificia Universidad Javeriana; 2008. www.javeriana.edu.co/biblos/tesis/ciencias/tesis105.pdf
3.         Jiménez Cambero C. investigo la evaluación de la calidad microbiológica de los alimentos listos para el consumo que se venden en la cafetería del centro universitario de la costa sur de Autlán, Jalisco. [título de master]Jalisco, México: universitario de la costa sur de Autlán; 2010.
http://www.uci.ac.cr/Biblioteca/Tesis/PFGMIA33.pdf
4.         Villacreses Freire R. Estudio evaluación del procesamiento artesanal del chocho (lupinus mutabilis sweet) sobre el consumo de agua, tiempo empleado y la calidad nutricional y microbiológica. [tesis de grado].Quito, Ecuador: universidad san francisco de quito; 2011.
repositorio.usfq.edu.ec/bitstream/23000/963/1/99493.pdf
5.         Coto R, Chávez C. Estudio  Calidad bacteriológica y detección de Bacillus cereus toxigénicos en arroz blanco cocido expendido en el área metropolitana de la provincia de San José. [tesis de título profesional].San José, Costa Rica: Universidad de Costa Rica; 2012.
http://www.scielo.org.ve/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0004-06222012000300011
6.         Ayerza, R. Coates, W. 1996. Producción, potencial Nuevo de Chía. Segunda. Editorial del Nuevo Extremo. Buenos Aires. Argentina. Pp. 8, 12,18.
7.         Barros, C. y Buenrostro, M. 1997. Chía, fuente maravillosa de sabor y salud. Grijalbo, México, 1997.
8.         Uribe, Pérez, Kauil, Rubio, & Alcocer.
9.         Espinosa L. la chicha como bebida, algunos análisis. (tesis pre Grado).Lima: Universidad Nacional Mayor de San Marcos; 1996.
10.       Espinosa L. la chicha como bebida, algunos análisis. (tesis pre Grado).Lima: Universidad Nacional Mayor de San Marcos; 1996.
11.       Mossel B. Microbiología de los Alimentos. Zaragoza, España: Editorial Acribia S.A. 2da  edición; 2002.
12.       Hernández R, Fernández-Collado C, Baptista P. Metodología de la Investigación. 4ta edición México: Editorial Mc Graw-Hill; 2006.
13.       Mendo M. Lecciones de Microbiología y Medios de Cultivo. 4ta  Edición. Lima, Perú: Editorial: Ediciones Laborales SIPL; 1995.
14.       Mossel B. Microbiología de los Alimentos. Zaragoza, España: Editorial Acribia S.A. 2da  edición; 2002.
15.         Brock T, Madigan M. Microbiología. México: Editorial Prentice Hall Hispanoamericano S.A. 6ta edición; 1993.
16.         Brooks G, Butel J, Ornston L. Microbiología Medica de Jawetz. Melnick y Adelberg. Quimioterapia Antimicrobiana Medica 15ava  edición. México DF: Editorial El Manual Moderno S.A de CU; 1989.

17.         Refai M. Manual para el control de calidad de los alimentos. Tomo IV. Análisis Microbiológico FAO _ Roma; 1981.